质检科普

空白试验是实验室质量控制的重要环节，做的熟练不仅可以减小误差，还可以及时发现试验中的失误，进一步倒查相关原因，所以提高空白试验值的准确性，对于提高测定结果的准确度至关重要。而在实际操作中，测出的空白实验值却常偏高，所以本期整理了提升空白试验准确度的经验内容，希望对大家有所帮助！

一、做空白试验的意义  

空白试验值：是指除用蒸馏水代替样品以外，其他所采用的分析方法、化学试剂、实验条件、操作步骤和仪器器皿等均与样品测定完全相同的操作过程，所测出的结果值。

由于影响空白试验值的因素很多，同时，这些因素对其影响的大小也经常不断变化。为了消除这些偶然因素对样品测定值的综合影响，在每次进行样品测定时，必须同时作空白试验值的分析。

对水体中痕量物质进行分析时，为了排除各种因素对测定结果的影响，必须要从测定值中扣除空白试验值。扣除的空白试验值是多次测定的统计平均值，随着样品测定次数的增加相应空白试验值的次数亦增加，而决不是扣除任意一个空白试验值。

在测定空白试验值时，如果发现其数值忽偏高、忽偏低或者波动性很大，则表明整个测定过程中存在问题，必然影响到测定的精密度和准确度。必须首先找出问题，并排除之，否则，其测定结果不可靠，不能使用。

二、影响空白试验值的因素 

影响空白试验值的因素与分析方法、试验条件等有密切的关系，同时还与试验用水、化学试剂纯度、容器的清洁度、仪器性能和实验室环境状况等情况也密切相关，这里列举影响空白试验值的几个主要因素：

1. 试验用水

试验用水是指配制或稀释试剂、淋洗器皿、空白试验等实验使用水。

在痕量分析工作中，应使用不含可测定成分的纯水，否则，空白试验值和标准偏差增大，从而影响样品的测定结果的精密度和准确度，因此，试验用水在试验前应进行检验，不合格一律不能使用。

检验方法：用蒸发或其它富集的方法，浓缩一定量的试验用水并与未浓缩的水样按同样的操作步骤分别进行测定，计算出试验用水中可能含有的待测物的浓度。如果其结果超过方法的检测下限，则不合格。

2. 试剂空白

如水体中痕量物质测试时所用的试剂较多，能够同其他影响空白值的因素综合测出，即空白试验值。因此，试剂空白是空白试验值的一部分，从空白试验值的大小，即能了解到试剂空白值的情况。

光度法测定所用的化学试剂在未参与反应前，各自的测定读数叫做试剂底色。例如：某些有色试剂，在光度分析法中可见光部分独自对测定波长的吸收值。在单独考虑空白试验值是否过大时，则应扣除试剂底色。但在测定样品时，则不必考虑试剂底色的影响。因为样品的测定值应当减去空白试验值，这样试剂底色就消除了。

试剂的纯度是影响空白值的重要因素之一，使用前必须进行检查，不合格试剂不能用。分析中所用试剂的纯度对空白试验值影响的大小，是随着该试剂纯度大小和用量多少而变化，对固定用量的试剂，其影响常常是一个定值。

为了减少试剂纯度对测定结果的影响，在痕量分析中应尽量选用优级纯或超级纯试剂，不符合级别的化学试剂或者虽然符合级别，但是由于密封不严，保管不妥，受到污染，或者存放时间过长使之变质、失效等化学试剂均不能采用。

3. 实验环境

痕量分析对实验室环境条件的要求极其严格，因为，实验室内的空气中常常含有各种挥发性气体和灰尘，它们之中往往含有待测物质和测定的干扰元素等，这些都对痕量分析的结果影响极大。同时，对空白试验值的大小及波动性也产生很大的影响。

所以，要求实验室内的环境和实验室周围的环境必须清洁，特别是在实验室的附近不能建有化工厂等，另外，操作者的个人卫生对空白试验值的影响也是很大的，特别是操作人员的双手，经常触及各种物品，易在分析过程中带人待测物或干扰物影响测定。所以，严格要求操作人员注意个人卫生，分析前后要洗净双手，在进行分析操作时，化验人员要穿工作衣等，决不允许进食、吸烟。

在实验室内不允许堆放与本试验无关的东西。在不清净的环境中，不能进行痕量分析，其空白试验值也无法准确地测定。

实验室内各分析项目的安排应注意不能相互干扰、交叉污染，所使用的试剂、器皿等也要单独存放，避免交叉污染，影响空白值。例如：测酚的实验室内不允许进行酚的精制，否则，空白中酚的含量特别高，另外还严重污染测酚的玻璃仪器、化学试剂等，使分析无法进行。

同时，实验室内不允许存放大量化学试剂，特别不允许大量存放有机试剂。因为这些化学试剂易挥发到空气中，污染环境，影响分析，还易发生不安全事故。

4. 分析器皿的清洁度

分析操作中所用的一切器皿，如玻璃仪器，金属塑料制品等，由于其原料不纯，在制造、运输、保管等过程中常常受到严重污染，使器皿的表面附着大量的被测成份和干扰物质，影响测定值和空白试验值。

因此，痕量分析时应选用优质的器皿，并且在使用前要用稀盐酸或稀硝酸浸泡24h，彻底洗净，洗净后的各种器血要妥善保管，防止在使用前再次受到污染。各个分析项目的玻璃器皿要专用，防止交叉污染。

注意：器皿的清洁度往往是分析操作成败的关键，易被分析人员所忽视，由此造成分析工作和空白试验值测定的失败，是屡见不鲜的，应当引起我们足够的重视。

5. 仪器的工作性能

分析测试中，常使用各种精密的测试仪器，这些仪器必须保持良好的工作状态，才能获得准确的测定结果和可靠的空白试验值，为此，平时要根据要求定时检定/校准，按仪器使用说明书妥善保管。使用前应对仪器进行调试和检查，测定其性能，各项指标必须符合规定标准。否则，不能使用。

注意：要格外留意仪器的外电源的电压、电流的波动对测定值的影响，必须保持仪器电源电压的稳定，如果外电源波动很大，则必须在仪器外再安装一台稳压装置，以确保仪器的电压稳定，仪器的安全接地也是一个很重要的因素，不能忽视。

三、解决空白值偏高经验分享  

1.水质总氮测定空白值偏高

在水质总氮测定中，任何一个环节把握不好都有可能造成空白值偏高，导致数据结果准确度不高，因此在实际操作中建议按照以下操作细节来进行控制：

（1）实验用水采用新鲜重蒸馏无氨水；

（2）过硫酸钾试剂采用质量优质的，并对每批进行空白实验，符合要求后再使用；

（3）氢氧化钠溶液和过硫酸钾溶液最好分开配制，待其溶解并冷却后进行合并；

（4）消解过程要严格遵守国标要求的方法进行，将消解时间控制在40 min，同时将消解温度控制在 (124±1) ℃范围内；

（5）实验室环境要保证干净，避免交叉污染。凡是能带入氮的水和试剂均不能在实验室使用；

（6）在实验室安排上，不能与用氨水、硝酸以及其它铵盐类试剂的分析项目安排在同一个实验室内进行。

（7）实验所用玻璃器皿均要清洗干净，最好用（1+9）盐酸清洗，再用超纯水冲洗数次，最后用无氨水冲洗数次，不能采用重铬酸钾和硝酸洗液洗涤，实验所用比色管应确认其密封性。

2.水质分析中氨氮的测定空白值高

实验中纳氏试剂和酒石酸钾钠对空白值的高低影响很大，可能使空白值高的原因如下：

（1）测定使用的蒸馏水被污染，含有影响实验结果的杂质，比如蒸馏水含氨；

（2）试管、移液管等仪器没有清洗彻底，这些因素对实验结果也有较大的影响；

（3）实验所用的无氨水质量不佳，含氨量比较高，导致实验得到的空白值偏高，这是最主要的原因；

（4）在配制酒石酸钾钠和钠氏试剂时出现较大偏差，导致实验所用的试剂纯度（酒石酸钾钠、钠氏试剂）不佳，从而导致实验得到的空白值偏高。

3.气相色谱空白值偏高

气相色谱测空白值偏高，可能是以下原因：

（1）进样口硅胶垫的影响

●进样针头质量不好，边缘不够平整，硅胶垫容易损坏或硅胶垫使用次数过多或时间长老化，硅胶垫质量不好，材料弹性差，硅胶垫碎屑进入汽化室。

●硅胶垫被污染，如进样时针头处附着的样品液滴被硅胶隔垫所吸附，在之后的分析过程中一点点脱附后进入色谱柱中。

（2）进样口、检测器或衬管和分流平板污染

●长时间未进行色谱仪的定期维护；

●汽化室和衬管内经常会聚集一些沉积物及高沸点物质，如果碰到某次分析高沸点物质时，进样口温度升高时就会使聚集的物质逸出造成空白值偏高；

●在检测器中和分流平板的凹槽中未挥发的物质会慢慢积累，造成空白值偏高。

（3）色谱柱的影响

●色谱柱未充分老化，柱温过低老化不充分，温度过高产生液相遗失；

●色谱柱长时间使用。柱自身有吸附特性，柱内余留高浓度样品或柱内留存高沸点物质，柱头被污染。再者毛细管柱低负荷量，需要高灵敏度检测器，这样就特别容易造成空白值偏高。

（4）试剂污染

试剂在进样前的处理过程中受到污染或试剂不纯。由于检测仪器和玻璃量器定期检定，以及采取了全面的质量管理措施，因此，若测定的空白实验值太大，一般是化学药品纯度不够，配制的试液变质或被污染等原因。这时，可重新配制试液，返工重测该批样品，直至空白实验值合格。

（来源： 实验室GB检测技术）